上海江莱生物科技有限公司
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| 试剂盒名称 | 钙网蛋白(酶免吸附法）ELISA试剂盒 |  |
| 规格 | 48T/96T | |
| 品牌 | 江莱生物 | |
| 检测方法 | ELISA酶联免疫法 | |
| 检测波长 | 450nm | |
| 样本 | 血清、血浆、细胞上清液等 | |
| 样本体积 | 50~100ul | |
| 研究X域 | 神经生物学、新陈代谢、免疫学等 | |
| 使用范围 | 仅用于科研实验 | |
| 保存 | 2~8℃，避光保存 |
钙网蛋白(酶免吸附法）ELISA试剂盒操作流程如下：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个X对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及X孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，X终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
钙网蛋白(酶免吸附法）ELISA试剂盒标准曲线计算
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