上海恒远生物科技有限公司
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一、“大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒”简介
【检测方法】：酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【产品性状】：96T/48T，盒装液体(两种统一规格)
【贮藏条件】：2-8°C
【有 效 期】：二年，我公司Elisa试剂盒均为X新批次，可放心购买。
【主要成分】：酶标板,试剂,标准品等。
【种 属】马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
【产品单价】（具体折扣来电咨询），可免费代测，含税含运费。
【标 本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
注：标本必须为液体，不含沉淀。
二、“大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒”特点概述
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原(或抗体)，使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察，又可用显微镜观察，也可以用分光光度计进行比色测定，还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变，从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质，应用酶免吸附技术进行比色测定，依据光密度值的变化，可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测，免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说，不需要荧光显微镜，也不需要测定放射性的特殊仪器，所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂，普通实验室及生产应用单位均易购置
8.价格X惠，质量保证，X大限度的节省实验经费。
三、实验原理：
结合在固相载体表面的抗原或抗体与受检标本（抗原或抗体）起反应。用洗涤的方法洗去未结合的抗原或抗体。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，根据呈色的深浅进行定性或定量分析。根据实际的应用方法，可以分成以下几种：
双抗夹心 ELISA：将捕获抗体包被在固相载体上，封闭后加入待检抗原，温育后加入酶标检测抗体，捕获抗体和检测抗体可以是针对不同表位的两种单抗，也可以是针对同一抗原的一种单抗与一种多抗，但是检测抗体需要经过酶标。
竞争ELISA：用待检抗原或抗体去干扰已经预先设计好的体系，X终显色的结果与待检抗原或抗体的干扰程度成负相关。主要应用于只有一个抗原表位的蛋白检测。
多因子ELISA检测技术：多重ELISA芯片技术通过在96孔板的每个孔中以阵列的形式植入1~25种捕获抗体，随后像ELISA一样操作，通过化学发光(HRP酶)和荧光燃料(红外)来检测。
受刺激的细胞产生的细胞因子是短暂的，并且不同细胞因子基因表达的动力学是变化的。通过ELISA实验只能检测到的免疫反应性的细胞因子蛋白的含量，而这并不能完全代表细胞因子的生物活性的水平。例如，使用抗细胞因子抗体的一种ELISA不能区别如TGF-β1的细胞因子蛋白是无活性的前体形式还是有活性的成熟蛋白。此外，一种ELISA可以检测部分降解的细胞因子蛋白，它们仍有免疫反应性（例如至少可识别两个表位），当时它可能却丧失了它们的生物学活性。
四、“大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒”技术流程
双抗体夹心法(检测未知抗原)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做X孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以X对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
间接法(检测未知抗体)
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做X、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标X二抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,X后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以X对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
五、大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒注意事项
1. 由于底物显色剂对光及其敏感，因此要避光保存。
2. 检测吸光度前应将酶标仪打开，将其预热30min以上。
3. 孵育的时间应该严格按照试剂盒说明书上的时间为准。
4. 要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。
5. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
六、“大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒”咨询和订购的方法
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